重组糖苷内切酶 H(Endo H)
- 别名:糖苷内切酶H
- 编码:DCE0447C
- 级别:
- 简介:糖苷内切酶H(Endo H)是一种重组糖苷酶,本产品来源于Streptomyces plicatus,采用大肠杆菌重组表达,无额外的内切和外切糖苷酶活性,可用于抗体或者其它糖蛋白的脱糖。与PNGase F(肽-N-糖苷酶F)不同,它切割所有的天冬酰胺连接的寡糖。
基础信息
来源 | Streptomyces plicatus |
储存液 | 20 mM Tris-HCl,50 mM NaCl,5mM EDTA,pH 7.5 |
活性 | >150U/ul |
应用 | 抗体及其相关蛋白去糖基化 |
产品介绍
产品描述
糖苷内切酶H(Endo H)是一种重组糖苷酶,能够对N-糖蛋白中的高甘露糖和某些杂合型寡聚糖的核心壳二糖核心进行切割,而不切割复杂多糖。酶切反应切割寡糖二乙酰壳二糖核心的两个N-乙酰基葡糖胺残基,切割后保留天冬酰胺的一个N-乙酰葡糖胺残基。该特性与PNGase F(肽-N-糖苷酶F)不同,它切割所有的天冬酰胺连接的寡糖。本产品来源于Streptomyces plicatus,采用大肠杆菌重组表达,无额外的内切和外切糖苷酶活性,可用于抗体或者其它糖蛋白的脱糖。
酶活定义:37℃,60 min从10ug变性RNase B中除去超过95%的碳水化合物所需要的酶量定义为1U。
储存液:20 mM Tris-HCl,50 mM NaCl,5mM EDTA,pH 7.5。
产品组分
重组Endo H | 3KU | 15KU |
10×Endo H反应缓冲液 | 500ul | 500ul |
10×糖蛋白变性缓冲液 | 500ul | 500ul |
储存:本品应储存于-20℃及以下,可保存至少12个月。
运输:干冰运输,活性稳定。
产品应用
抗体或者其它糖蛋白的N-连接高甘露糖的去除。
使用方法(仅供参考)
用去离子水溶解1-10ug糖蛋白,加入1ul 10×糖蛋白变性缓冲液,并用去离子水定溶至10ul;
100℃孵育10 min
配制以下反应体系
成分 | 用量 |
变性糖蛋白 | 10ul |
10×Endo H反应缓冲液 | 2ul |
重组Endo H | 2-4ul |
水 | 补足20ul |
37℃孵育60分钟,反应完成后进行SDS-PAGE或HPLC分析酶切结果
注意事项
本品收到后尽量避免反复冻融;
使用时请穿实验服并佩戴一次性手套;
本品不得直接用于临床诊断和治疗。
质量指标
MSDS
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