重组羧肽酶B

重组羧肽酶B专一水解蛋白质C-末端碱性氨基酸（赖氨酸、精氨酸、组氨酸），又称为肽酰-L-赖氨酸（L-精氨酸）水解酶；精蛋白酶。分子量为35kD，等电点为6.0，最适pH为7-9。活性受精氨酸、赖氨酸的竞争性抑制，金属离子螯合剂如EDTA等抑制酶活。

酶活定义：25℃，pH7.6，1min催化1μmol马脲酰-L-精氨酸水解的酶量为一个酶活单位。

推荐使用方法：溶解：终浓度1-10mg/ml溶解在纯水或10mM Tris-HCl (pH7.5)中。

使用：酶量：目的蛋白=1:50-1:1000（w:w）. 最适酶切pH为7.0-9.0。

羧肽酶B（E.C 3.4.17.2）属金属羧肽酶A和羧肽酶B（CPA/CPB）家族，可选择性水解蛋白或多肽羧基端的Arg和Lys。不同于切割芳香族或脂肪类氨基酸残基的羧肽酶A，羧肽酶B优先切割碱性氨基酸※，同时也能切割一些非碱性氨基酸。重组CPB的活性受到典型的金属螯合剂如EDTA，及Cu2+，Hg2+抑制；而Zn2+，Mn2+等金属离子则能够不同程度提高酶活。CPB的最适pH为8.0，偏酸或偏碱均会造成活性下降，pH接近5.0时活性接近零，pH>12.0时活性完全丧失。CPB在一定温度内（<60 ℃）活性随温度升高而上升。

SDS-PAGE显示纯度＞90%。

保存：25 mmol/L Tris-HCl， pH 7.6或无菌水；溶解后分装-15 ℃以下保存。

酶切体系：pH 7.5~9.0；

推荐使用量：蛋白酶：融合蛋白质量比1：50~1：1000

储存稳定性：冻干粉存于-15 ℃以下，24个月稳定；25 mmol/L Tris-HCl，pH 7.6溶解后分装储存于-15 ℃以下，

储存稳定性：反复冻融5次，活性无损失；溶解后2~8 ℃保存建议不超过3 d。

运输稳定性：冰袋保温运输，活性稳定。

RCPB特异性酶切合成短肽
合成多肽序列YGKRLWK,理论酶切位点酶切产物YGKRLW及K，蛋白酶：合成多肽质量比1：5000，37 ℃酶切反应10 min，LC-MS验证酶切反应特异性。