Seebio® 热启动 Taq SYBR Green qPCR预混液(2X)

  • 别名:Seebio®Hot Star TaqMan SYBR Green qPCR Master Mix(2X)(Universal)
  • 编码:DAA1097A
  • 级别:
  • 简介:Seebio® 热启动 Taq SYBR Green qPCR预混液(2X) 利用了一种性能增强的Taq DNA聚合酶,通过热启动激活技术进行保护,并优化了qPCR缓冲系统来进行基于SYBR Green I的定量PCR。本混合物在2倍反应浓度下制备,可直接用于稳健、低模板的定量PCR,具有高灵敏度、特异性和可靠性。
品牌 货号 包装规格 库存 价格 数量
Seebio DAA1097A-1ml 2 × 500 µl 面议
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基础信息

中文名Seebio® 热启动 Taq SYBR Green qPCR预混液(2X)
英文名Seebio®Hot Star TaqMan SYBR Green qPCR Master Mix(2X)(Universal)

产品介绍

【产品基本信息用途】

        Seebio® 热启动 Taq SYBR Green qPCR预混液(2X) 利用了一种性能增强的Taq DNA聚合酶,通过热启动激活技术进行保护,并优化了qPCR缓冲系统来进行基于SYBR Green I的定量PCR。本混合物在2倍反应浓度下制备,可直接用于稳健、低模板的定量PCR,具有高灵敏度、特异性和可靠性。


【产品特点和优势】

²    所用Taq DNA聚合酶经改构和优化,具有热启动、更高灵敏性和更高可靠性;

²    优化的扩增缓冲系统,保障高的扩增信号强度和低模板有效扩增;

²    2×预混液使反应液配制更方便快捷。


【运输、储存条件和有效期】

      干冰运输。-20℃保存,有效期2年


【必备主要试剂和仪器】

1.Real Time PCR 扩增仪

2.实验专用反应管或反应板

3.PCR 引物

4.灭菌水

5.微量移液器和枪头(已高压灭菌)

6.ABI 7300/7500/7500 F/StepOnePlus等扩增仪需ROX Reference Dye。


【使用方法】

1.     配制qPCR反应混合液

组分

体积(µl/rxn

终浓度

2×SYBR Green qPCR预混液

10

1×

模板

可变

1-100ng

正向引物(5µM

1

0.2-1µM

反向引物(5µM

1

0.2-1µM

Rox reference Dye50×)

按仪器需要

1×

dH2O

至终体积20

-

总体积

20

-


2.     qPCR程序设定

本试剂盒可应用于两步和三步程序,三步法更好。如果扩增效率较差,则可以延长热启动时间,可以降低退火温度或增加延长时间。如果扩增特异性较差,则可以适当地提高退火温度。

二步法

变性

PCR40 cycles

融解曲线 (1 cycle)

变性

退火/延申

温度

95

95

60

95

60

95

时间

30s~10min

15s

30~60s

15s

60s

15s


三步法

变性

PCR40 cycles

融解曲线 (1 cycle)

变性

退火

延申

温度

95

95

50~60

72

95

60

95

时间

30s~10min

15s

30s

30s

15s

60s

15s


3.     结果分析

扩增曲线:CT值范围一般为15~35,20~28的范围较好。如果CT值过低,则增加模板的稀释率。如果CT值过高,则提高模板或引物的浓度,甚至调整qPCR程序。融解曲线:通常只有当融解曲线为单峰时,才能得到定量结果。如果在融解曲线上有多个峰,则需要优化条件,如重新设计引物。

质量指标

MSDS

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