mRNA Cap-2'-O-甲基转移酶

体外转录获得的mRNA未经细胞内一系列修饰，不具备Cap 结构与PolyA 尾，容易降解，易激活免疫反应，不能与核糖体起始蛋白结合，没办法启动蛋白翻译，因而在工业化mRNA生产中，需使用牛痘病毒加帽酶对IVT 的mRNA进行加帽修饰，使mRNA的5' 端获得Cap0 结构，进一步使用2'-O- 甲基转移酶将Cap0 转化为Cap1。酶法加帽引入的帽结构与真核生物体内自然帽结构一致，从根本上降低外源mRNA 免疫原性的同时，保护其不被降解，并提高翻译效率，增加细胞内蛋白产量。通过酶法加帽可获得完整的加帽效率，而通过化学合成帽类似物结构加帽，其加帽效率相对较低，并且帽类似物结构与自然帽结构有差异。

mRNA Cap 2´-O-Methyltransferas 可利用 S-腺苷甲硫氨酸（SAM）作为甲基供体， 在 RNA 5´末端紧邻帽结构（Cap 0）的邻近的核苷酸的 2´-O 上添加甲基基团，形成带有 Cap 1 结构的 mRNA。Cap1 结构能增强 mRNA 的翻译效率，从而可提高转染后 mRNA 编码的蛋白表达水平。该酶只能以带 7-甲基鸟苷帽结构（m7GpppN）的 RNA 为底物，不会作用于 5´末端为pN、ppN、 pppN 或 GpppN 的 RNA。带 7-甲基鸟苷帽结构（m7GpppN）的 RNA 可通过 Vaccinia Capping System来制备。 

Cap0 结构的 mRNA 2´-O 甲基化（Cap1），以提高 mRNA 的翻译和表达效率。