体外方法的优点是可以将功能性抗体片段的克隆、选择以及阳性抗体编码基因的分离结合。可以选择具有高通量潜能的抗体，并根据需要精确定制抗体亲和力和特异性。噬菌体和酵母展示技术是常见的展示方法。抗体展示文库是这一概念较成功的应用。
西宝生物目前开发的噬菌体展示技术服务平台涵盖了免疫抗体库、天然抗体库等常用的文库类型，可根据客户的特殊需求定制个性化文库，并提供灵活有效的筛选服务。
噬菌体展示技术路线
将噬菌体展示文库作为可溶相，而将与欲选择的重组基因产物有特异性亲和力的靶分子固定在一个固相载体上，洗去不能与固定相特异结合的文库的大部分成员，将特异结合的成员洗脱下来，再进一步扩增，进入下一轮淘选。
全人源抗体库构建流程（图片来源于网络）
常用的噬菌体
溶源性的单链丝状噬菌体(如M13、f1和fd)
服务内容
服务描述 | 服务周期 | |
cDNA 合成 | 免疫细胞收集，总RNA提取，反转录合成cDNA。 | 1周 |
质粒构建 | 以以上cDNA为模板, PCR扩增抗体基因片段，并连接至载体 (例如：pComb3或pCANTAB5e载体) 。 | 4周 |
转化 | 将已构建好的载体电转化至大肠杆菌菌株。 | 1周 |
库容鉴定 | (1)以上转化菌株复苏后，梯度稀释，并涂布平板，计算阳性克隆数； (2)挑选10个阳性单克隆，提取质粒后，进行酶切验证; (3)通过阳性克隆数和酶切验证的结果，计算抗体库库容。 | |
抗体库生产 | 通过辅助噬菌粒拯救获得噬菌体展示抗体库。 | 1周 |
服务信息
邮箱: market@seebio.cn
电话: 400-021-8158
