糖链抗原15-3(CA15-3)-磁微粒化学发光（吖啶酯）解决方案

专题推荐 | 2023-09-26

1.项目背景

糖链抗原15-3(CA15-3)是粘蛋白1（Mucin1或MUC1）经水解后的一种可溶形式。

《乳腺癌诊疗指南（2022）》指出：CA15-3、癌胚抗原是乳腺癌中应用价值较高的肿瘤标志物，主要用于转移性乳腺癌患者的病程监测。CA15-3和癌胚抗原联合应用可显著提高检测肿瘤复发和转移的敏感性。由于其对局部病变的敏感性低，且在某些良性疾病和其他器官的恶性肿瘤中也可升高，因此不适合用于乳腺癌的筛查和诊断。有研究表明，CA15-3项目可用于辅助II期和III期乳腺癌患者的监控。对患者进行连续检测得到的CA15-3检测值应与其他临床方法联合用于监控乳腺癌。

性能表现（化学发光（吖啶酯）平台）

2.1 抗体配对组合：

糖链抗原CA15-3单克隆抗体（货号：EKY0017I）包被羧基磁珠+糖链抗原CA15-3单克隆抗体（货号：EKY0017J）标记吖啶酯；

2.2 具体指标

参考《YY/T 1176-2010 癌抗原CA15-3定量测定试剂（盒）（化学发光免疫分析法）》

a 最低检出限：不高于1.0 U/mL。

用零浓度校准品或样本稀释液作为样本进行检测，重复测定20次，得出20次测量结果的RLU值(相对发光值)，计算其平均值(M)和标准差(sD)，得出M+2SD，根据零浓度校准品和相邻校准品之间的浓度一RLU值结果进行两点回归拟合得出一次方程，将M+2SD的RLU值带入上述方程中，求出对应的浓度值，即为最低检测限。

CA15-3 最低检出限
空白样本（n=20）		发光值
1		697
2		726
3		638
4		668
5		677
6		639
7		638
8		683
9		715
10		689
11		693
12		713
13		676
14		635
15		723
16		693
17		697
18		625
19		748
20		680
Mean		683
SD		34
M+2SD		751
9.2 U/mL	1	17283
	2	18901
	3	18980
	Mean	18388
最低检出限 U/mL		0.03

b 重复性：分别为1.9%及2.6%

用 30U/mL±6U/mL和 150U/mL±30U/mL的样本各重复检测10次，计算10次测量结果的平均值M和标准差SD，根据公式CV=SD/M*100％得出变异系数CV。其变异系数(CV)应不大

于10％(仪器自动操作法)或不大于15％(手工操作法)。

CA15-3 重复性
序号	发光值	浓度值U/mL	发光值	浓度值U/mL
1	52225	31.74	217968	162.60
2	50512	30.63	212318	157.25
3	49512	29.98	215140	159.91
4	50515	30.63	224639	169.02
5	51016	30.95	219351	163.92
6	50336	30.51	224923	169.29
7	49061	29.69	218999	163.59
8	50503	30.62	211526	156.51
9	49790	30.16	218945	163.53
10	50802	30.82	218211	162.83
M	50427	30.57	218202	162.85
SD	873	0.57	4443.91	4.24
CV	1.7%	1.9%	2.0%	2.6%

c 线性范围： 1 U/mL- 至少200U/mL。

将接近线性范围上限的高值样本按一定比例稀释为至少5种浓度，其中低值浓度的样本须接近线性范围的下限。按试剂(盒)说明书进行操作，每一浓度重复检测2次，计算平均值，将结果平均值和稀释比例用最小二乘法进行直线拟合，并计算线性相关系数r。

线性范围上限不应低于参考值的5倍，下限应低于参考值的1/5（参考罗氏CA19-9参考值为26.4 U/mL (第95百分位数)、28.5 U/mL (第97.5百分位数)、34.5 U/mL (第99百分位数)）。在生产企业所规定的线性范围内，试剂(盒)的相关系数r应≥0.99。

CA15-3 线性
线性	实测值均值U/mL	理论值U/mL
线性1	0.40	0.20
线性2	1.53	0.81
线性3	5.64	3.22
线性4	18.36	12.90
线性5	58.13	51.58
线性6	206.33	206.33
线性相关系数r		0.9994

d 回收率：88.5%。

将浓度约为200U/mL(允许偏差为±20％)的癌抗原CA15-3样品(A)加入血清或其他相应的基质样品B中，所加入A的体积宜不超过总体积（A+B）的10%。

回收率应在(85％～115%)范围内。

序号	混合样本U/mL	低值样本U/mL	高值样本U/mL
1	25.60	11.93	166.37
2	25.08	11.60	175.66
3	25.92	11.90	162.97
均值	25.53	11.81	168.33
回收率	88.5%

3.临床相关性（化学发光（吖啶酯）平台）

西宝生物发光平台CA15-3抗体配对与Roche CA15-3试剂赋值的临床样本（高值部分）相关性R²>0.94，相关性良好；低值部分（≤60 U/mL）相关性R²>0.90，相关性同样较好。

4.测试方案

特别注明：

1）若客户采用吖啶酯体系，建议CA15-3抗体与吖啶酯的标记摩尔比在1:4左右；

2）若客户采用碱性磷酸酶或辣根过氧化物酶体系，建议优化酶与抗体标记的摩尔比例。

待测样本:预稀释样本加样量20ul；采用合适的稀释液将样本稀释10倍；

试剂1：糖链抗原CA15-3单克隆抗体（货号：EKY0017I）-磁珠稀释物，用量50ul/测试；

试剂2：糖链抗原CA15-3单克隆抗体（货号：EKY0017J）-吖啶酯稀释物，用量50ul/测试；

反应条件：

第一步：20ul预稀释样本（10倍稀释）+50ul试剂1混合，37℃孵育9min，清洗；

第二步：加入50ul试剂2混合，37℃孵育9min，清洗；

第三步：加入预激发液及激发液，进行测试。

测试使用发光仪器:科斯迈SMART 500S；可适用于各类吖啶酯体系的化学发光仪器（如四川迈克、深圳亚辉龙、山东康华生物、基蛋生物、南京诺尔曼等）

5.产品信息(可提供大包装试剂)

产品名称	货号	推荐配对
糖链抗原CA15-3单克隆抗体	EKY0017I	糖链抗原CA15-3单克隆抗体（货号：EKY0017I）包被羧基磁珠+糖链抗原CA15-3单克隆抗体（货号：EKY0017J）标记吖啶酯（抗体配对组合）
糖链抗原CA15-3单克隆抗体	EKY0017J
糖链抗原CA15-3单克隆抗体（货号：EKY0017I）-羧基磁珠浓缩液	DKY1319A
糖链抗原CA15-3单克隆抗体（货号：EKY0017J）-吖啶酯浓缩液	DKY1319B
羧基磁珠(超顺磁)，1um	DEG0091B-1-100mg
羧基磁珠(超顺磁)，3um	DEG0091A-3-100mg