艰难梭菌（Clostridium difficile，CD）是一种专性厌氧的革兰阳性杆菌，可存在于正常的肠道菌群中，当大量应用广谱抗生素、免疫抑制剂或化疗药物后可导致肠道菌群失调，艰难梭菌过度繁殖并分泌毒素进而引发艰难梭菌感染（Clostridium difficile infection，CDI）。CDI主要临床症状为腹泻、腹痛、发热等，严重者可引发伪膜性肠炎，可伴中毒性巨结肠、肠穿孔、感染性休克等并发症，甚至导致死亡。有研究报道，临床上约10-25%的抗生素相关腹泻、50-75%的抗菌药物相关性结肠炎和90-100%伪膜性肠炎是由CDI引起的。美国疾病控制与预防中心2019年发布的抗菌药物耐药威胁报告中，将CD列为对公共卫生健康威胁级别最高的“极危（Urgent）”等级，警示级别高于被列入“严重（Serious）”等超级细菌如耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌（MRSA）、产ESBLs肠杆菌目细菌等。此外CD菌株分为产毒株和非产毒株，产毒株主要产A（肠毒素）、B（细胞毒素）两种毒素。由高产毒株引起的CD相关性腹泻在儿童人群中具有较好的复发率和死亡率，且在较多国家和地区引起院内爆发流行。

2017年我国发布了《中国成人艰难梭菌感染诊断和治疗专家共识》，将CDI诊断标准更新为： 患者出现中至重度腹泻或肠梗阻，并满足以下任一条件：

（1）粪便检测CD毒素或产毒型CD结果阳性；

（2）内镜下或组织病理检查显示伪膜性肠炎。

艰难梭菌的检测包括：菌株检测、毒性检测、毒素的核酸检测。

通常使用酶免疫方法直接检测粪便标本中的GDH抗原，具有快速，价格低廉且阴性预测值高等优点，适合进行CDI初筛试验，我国临床实验室通过原核表达GDH，建立GDH胶体金免疫层析检测法，成功研制出胶体金试纸，可以快速、准确、方便地诊断CDI。GDH检测结果阴性即可排除CDI，但由于GDH是CD菌株表面的一种共同抗原，阳性结果还需经过毒素检测进一步确认是否为产毒型菌株。

目前国内外最常用的毒素免疫检测方法包括酶免疫分析（Enzyme immunoassay，EIA）与酶联免疫吸附试验法（Enzyme linked immunosorbent assay，EIASA）。这两种方法通过抗原-抗体反应直接检测腹泻粪便标本中的tcdA/B，具有特异性高，可以区分出产毒型与非产毒型菌株等优势，操作简便，可在数分钟至1小时内即可得出检测结果。 腹泻样本无须培养，可直接采用试剂盒对样本中的谷氨酸脱氢酶（GDH）抗原和毒素A/B同时进行检测，如果二者结果不一致，需结合PCR检测tcdB基因，判断样本中有无产毒艰难梭菌。结果判读：

a）GDH+/毒素+：样本中存在产毒艰难梭菌；

b）GDH+/毒素-：PCR检测tcdB基因，tcdB+则样本中存在产毒艰难梭菌，tcdB-则样本中无产毒艰难梭菌；

c）GDH-/毒素+：PCR检测tcdB基因，tcdB+则样本中存在产毒艰难梭菌，tcdB-则样本中无产毒艰难梭菌；

d）GDH-/毒素-：样本中无艰难梭菌。

核酸分子诊断目前在临床微生物诊断领域已被广泛使用，具有特异性好、灵敏度高、检测结果稳定等特点。近年来，通过核酸扩增技术（Nucleic acid amplification test，NAAT）诊断CDI病例的方法也备受青睐，多项研究结果表明NAATs不但提高了灵敏度而且缩短了检测周期。

西宝生物作为体外诊断试剂原料上游供应商，目前研发筛选出艰难梭菌免疫学检测的单克隆抗体能够特异性识别谷氨酸脱氢酶（GDH）、毒素A（tcdA）和毒素B（tcdB），tcdA与tcdB分别为肠毒素与细胞毒素。西宝生物研发团队通过数10株以上抗体精心筛选出配对抗体，经过多家客户验证，可以用于胶体金、乳胶等免疫层析诊断试剂的生产。灵敏度约为1ng/ml，可替代进口原料。