酶免疫测定法（Enzyme Immunoassay，简称EIA）是一种将酶的催化功能与抗原-抗体反应相结合的免疫学测定技术。EIA常用的方法又包括酶联免疫吸附实验（ELISA）、酶免疫组化法（IHC），前者测定可溶性抗原和抗体，后者测定组织中或细胞表面的抗原。该方法利用酶作为标记物，最终形成酶标记抗原抗体复合物，从而实现对目标分子的定性和定量分析。酶免分析免疫试剂具有检测灵敏度高、特异性好、重复性高等优点。酶免疫分析试剂在生物学、医学、环境和食品检测等多个领域得到广泛应用。其应用前景广阔，特别是在临床医学诊断、食品安全性检测以及环境。

酶免分析免疫试剂所需原料主要包括抗原、抗体、酶标记剂、控制品、基质和微孔板等。其中，抗原和抗体是酶免分析免疫试剂的核心原料，主要用于形成酶-抗体或酶-抗原复合物来检测样品中的分子。酶标记剂是将特异性抗体与酶进行反应生成的复合物。常见的酶标记剂有过氧化物酶（HRP）、碱性磷酸酶（AP）等。控制品用于确定酶免分析免疫试剂测定的准确性和可行性。基质是显色底物和停止底物的混合物。

碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase ,AP)是一种膜结合糖蛋白。AP在自然界中广泛分布，包括原核生物和更高的真核生物。其活性位点中包括两个锌离子和一个镁离子，这三个位点的金属离子对于酶活性至关重要。碱性磷酸酶可以水解各种单磷酸酯，并释放无机磷酸盐。1,2-二氧杂环丁烷化合物AMPPD作为一种超灵敏的碱性磷酸酶底物，在碱性磷酸酶的催化作用下，磷酸根基团水解，形成一个不稳定的中间体，自行分解后四元环断裂释放出大量能量，从而激发化学发光反应。因此磁珠-抗体偶联物与碱性磷酸酶-抗体偶联物在化学发光试剂盒中可作为固相捕获试剂和酶标试剂用于检测血清中的痕量抗原。与辣根过氧化物酶(HRP)相比，碱性磷酸酶具有稳定性和高敏感性的优势。AP在生物学尤其是分子生物学和免疫学领域有着广泛的应用。

辣根过氧化物酶，简称HRP，HRP是一种单链多肽，含有4个二硫桥。它是一种糖蛋白，含有18％的碳水化合物。该碳水化合物组成包括半乳糖，阿拉伯糖，木糖，岩藻糖，甘露糖，甘露糖胺，半乳糖胺，这取决于特定的同功酶。 它的分子量（44 kDa）包括分子量（33,890道尔顿）的多肽链，血红素加Ca2 +（700道尔顿），碳水化合物（约9,400道尔顿）。有7种HRP的同工酶存在。辣根过氧化物酶的等电点范围从3.0 - 9.0。辣根过氧化物酶是目前使用广泛的一种标记酶，用来标记抗体或其它蛋白质，既能用于定位检测，也能用于定量测定。 辣根过氧化物酶（HRP）的从辣根根（Amoracia RUSTICANA）中分离。它是用于生物化学中的应用，如western印迹，ELISA和免疫组化。辣根过氧化物酶是用来放大弱信号，增加被探测的目标分子，如蛋白质。它通常被用于确定葡萄糖和溶液中的过氧化物的量。它也被用于在烟曲霉快速药敏测定。

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